作者: 江彬
Tel : 1991-4747-194
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化布氏杆菌(Bb)抗原预包被板ELISA 原理,检测人血清/血浆中存在的布氏杆菌IgM型抗体,并配以酶标记抗人IgM单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统(biotin-avidin system)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂盒之独特点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的布氏杆菌(Bb)IgM型抗体。对布氏杆菌近期感染状况的诊断具有重要参考价值。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块(4X12/8X12)
2、阴性对照 1瓶
3、阳性对照 1瓶
4、标本稀释液 1瓶(10/20 ml,直接使用)
5、酶结合物 1瓶(5/10ml,直接使用)
6、30X浓缩洗液
1瓶(20/10ml,加蒸馏水1:30稀释使用)
7、显示剂A、B液 各1瓶(2.5/5ml)
8、终止液(2M H2SO4) 1瓶(2.5/5ml)
9、说明书 1份
[操作步骤]
1. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。
2. 加样:用标本稀释液以1:40(5ul-200ul)稀释待检血清标本后,取100ul加入到反应板孔中,
分别加阴阳性对照各100ul于反应板中,并设空白对照一孔(加100ul标本稀释液)。
3. 37 ℃ 温育 30 分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板 3 次并在吸水纸上拍干。
4. 加酶结合物:每孔 2 滴(或100ul),混匀后置 37 ℃ 温育 30 分钟。同上法洗涤 3 次并拍干。
5. 显色:每孔加显色剂A、B各1滴(或各50ul),轻拍混匀(或震荡器混匀)后置 37 ℃ 10 分钟。
[结果判断]
1. 目测:在白色背景下观察各孔显色情况,兰色者为阳性,无色者为阴性。
2. 酶标仪测定:每孔加终止液1滴(或50ul),混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
① P/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。
② P/N≥2.1为阳性;
③ 1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴 性。
④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1. 微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余者封存置2-8℃。
2. 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。
3. 洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。
4. 试剂置2-8℃存放,不能冻结,有效期10个月。
5. 避免用溶血、混浊或脂血标本。
6. 最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周(样本应避光)。
布氏杆菌(Bb)IgG抗体
检测试剂盒(酶联免疫法)
使 用 说 明(48T/96T)
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化布氏杆菌(Bb)抗原预包被板ELISA 原理,检测人血清/血浆中存在的布氏杆菌IgG型抗体,并配以酶标记抗人IgG单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应,在450nm波长测各孔O.D值,O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统(biotin-avidin system)的稳固级联放大作用,使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高是本试剂盒之独特点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆中的布氏杆菌(Bb)IgG型抗体。对布氏杆菌既往感染状况的诊断具有重要参考价值。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块(4X12/8X12)
2、阴性对照 1瓶
3、阳性对照 1瓶
4、标本稀释液 1瓶(10/20 ml,直接使用)
5、酶结合物 1瓶(5/10ml,直接使用)
6、30X浓缩洗液
1瓶(20/10ml,加蒸馏水1:30稀释使用)
7、显示剂A、B液 各1瓶(2.5/5ml)
8、终止液(2M H2SO4) 1瓶(2.5/5ml)
9、说明书 1份
[操作步骤]
1、将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。
2、加样:用标本稀释液以1:40(5ul-200ul)稀释待检血清标本后,取100ul加入到反应板孔中,
分别加阴阳性对照各100ul于反应板中,并设空白对照一孔(加100ul标本稀释液)。
3、37 ℃ 温育 30 分钟。甩去孔内液体,用洗涤液洗板 3 次并在吸水纸上拍干。
4、加酶结合物:每孔 2 滴(或100ul),混匀后置 37 ℃ 温育 30 分钟。同上法洗涤 3 次并拍干。
5、显色:每孔加显色剂A、B各1滴(或各50ul),轻拍混匀(或震荡器混匀)后置 37 ℃ 10 分钟。
[结果判断]
1、目测:在白色背景下观察各孔显色情况,兰色者为阳性,无色者为阴性。
2、酶标仪测定:每孔加终止液1滴(或50ul),混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
(1)P/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。
(2)P/N≥2.1为阳性;
(3)1.5≤P/N<2.1为可疑标本; P/N<1.5为阴 性。
(4)阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
(5)阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1、 微孔板须密封防潮,从冷藏环境中取出时,应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用,余者封存置2-8℃。
2、滴加试剂前应将液体翻转数次混匀,滴加时保持瓶身垂直。
3、洗涤时每孔均须加满,防止孔内有游离酶不能洗净。
4、试剂置2-8℃存放,不能冻结,有效期10个月。
5、避免用溶血、混浊或脂血标本。
6、最好用新鲜标本,如需保存,可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周(样本应避光)。