使用说明（96T/48T）
作者： 江彬
Tel : 1991-4747-194
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化进口柯萨奇病毒B组（CVB）1-6型的混合抗原预包被板ELISA 原理，检测人血清/血浆/脑脊液等存在的柯萨奇病毒的IgM 抗体，并配以酶标记抗IgM u链单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正比。生物素系统（biotin-avidinsystem）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高;另外，血清/血浆/脑脊液等经预吸收后非特异性因素（如RF因子和变性或聚合的人IgG）的影响被彻底消除，经验证其结果完全等同于capture-ELISA,为本试剂盒之独特点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆/脑脊液等存在的柯萨奇病毒的IgM抗体。对新生儿、婴幼儿及儿童和成人呼吸道近期感染的诊断与鉴别诊断具有重要的价值。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块（8X12/4X12） 2、阴性对照血清1瓶（直接使用）
3、阳性对照血清1瓶（直接使用）
4、酶结合物1瓶（10/5ml，直接使用）
5、标本稀释液（含抗干扰因子）
1瓶（20ml/10ml，直接使用）
6、30X浓缩洗液
1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）
7、显示剂A、B液各1瓶（5/2.5ml）
8、终止液（2MH2SO4） 1瓶（5/2.5ml）
9、说明书1份
[操作步骤]
1． 样本稀释：标本（血清、脑脊液）用标本稀释液以1：41（5ul—200ul）稀释标本，混匀后置37℃20分钟。
2． 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。
3． 加样：小心吸取已稀释待检标本上清液100ul于反应孔中，设阴、阳性对照（各100ul）及空白对照（加100ul标本稀释液）各一孔。轻拍混匀。
4． 37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。
5． 加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
6． 显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。
[结果判断]
1. 目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。
2. 酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
① S/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。
②S/N≥2.1为阳性；
③1.5≤S/N<2.1为可疑标本;S/N<1.5为阴性。
④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
⑤ 对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1． 微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。稀释标本时用试管，稀释完后混匀置于孵育箱37℃。
2． 滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。
3． 洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
4． 试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。
5． 避免用溶血、混浊或脂血标本。
6． 最好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。
7． 本试剂盒标本稀释液中含有抗干扰因子，可彻底消除聚合人IgG或RF所致假阳性。
埃可病毒（ECHO） IgM 抗体
检测试剂盒（酶联免疫法）
使用说明（96T/48T）
[原理]
本试剂盒采用亲和素-生物素化进口ECHO（1-9型）混合抗原预包被板 ELISA 原理，检测人血清/血浆/脑脊液等存在的埃可病毒的IgM 抗体，并配以酶标记抗人 IgM u 链单克隆抗体作为标记物。加入底物TMB显色后终止反应，在450nm波长测各孔O.D值，O.D值的大小与待检抗体含量成正 比。生物素系统（biotin-avidin system）的稳固级联放大作用，使试剂的特异性、灵敏度、稳定性极大地提高;另外，血清/血浆/脑脊液等经预吸收后非特异性因素（如RF因子和变性或聚合的人IgG)的影响被彻底消除，经验证其结果完全等同于capture-ELISA,为本试剂盒之独特点。
[用途]
本试剂盒用于定性检测人血清/血浆/脑脊液等存在的埃可病毒的IgM 抗体。对新生儿、婴幼儿及儿童和成人急性胃肠炎、无菌性脑膜炎、心肌炎及呼吸道近期感染的诊断与鉴别诊断具有重要的价值。
[试剂盒组成]
1、生物素化抗原预包被板 1块（8X12/4X12）2、阴性对照血清1瓶（直接使用）
3、阳性对照血清1瓶（直接使用）
4、酶结合物1瓶（10/5ml，直接使用）
5、标本稀释液（含抗干扰因子）
1瓶（20ml/10ml，直接使用）
6、30X浓缩洗液
1瓶（20/10ml，加蒸馏水1：30稀释使用）
7、显示剂A、B液 各1瓶（5/2.5ml）
8、终止液（2MH2SO4） 1瓶（5/2.5ml）
9、说明书1份
[操作步骤]
1. 样本稀释：如果标本是血清，则用标本稀释液以1：41（5ul—200ul）稀释标本，混匀后置37℃20分钟。如果标本是脑脊液，则用标本稀释液以1：101（2ul—200ul）稀释标本，混匀后置37℃20分钟。
2. 将试剂盒平衡至室温后取出反应板拆封后置于板架上。
3. 加样：小心吸取已稀释待检标本上清液100ul于反应孔中，设阴、阳性对照（各100ul）及空白对照（加100ul标本稀释液）各一孔。轻拍混匀。
4. 37℃温育30分钟。甩去孔内液体，用洗涤液洗板3次并在吸水纸上拍干。
5. 加酶结合物：每孔2滴，混匀后置37℃温育30分钟。同上法洗涤3次并拍干。
6. 显色：每孔加显色剂A、B各一滴，轻拍混匀（或震荡器混匀）后置37℃10分钟。
[结果判断]
1.目测：在白色背景下观察各孔显色情况，兰色者为阳性，无色者为阴性。
2.酶标仪测定：每孔加终止液一滴，混匀后在450nm下测定各孔O.D值。
① S/N=标本O.D值/ 阴性对照O.D值。
②S/N≥2.1为阳性；
③1.5≤S/N<2.1为可疑标本;S/N<1.5为阴性。
④ 阴性对照(NC)小于0.10时以0.10计, 大于0.1小于0.21时以实际O.D值计算;若大于0.21时,实验可能出现了较大误差,需重复实验。
⑤ 阳性对照(PC)值通常≥0.4,实验成立,否则需重做。
[注意事项]
1.微孔板须密封防潮，从冷藏环境中取出时，应置室温平衡至潮气尽干后方可开启使用，余者封存置2-8℃。稀释标本时用试管，稀释完后混匀置于孵育箱37℃。
2.滴加试剂前应将液体翻转数次混匀，滴加时保持瓶身垂直。
3.洗涤时每孔均须加满，防止孔内有游离酶不能洗净。
4.试剂置2-8℃存放，不能冻结，有效期10个月。
5.避免用溶血、混浊或脂血标本。
6.最好用新鲜标本，如需保存，可于2-8℃冷藏48小时或-20℃冻存4周（样本应避光）。
7.本试剂盒标本稀释液中含有抗干扰因子，可彻底消除聚合人IgG或RF所致假阳性。
