游离甲状腺激素(FT4)定量测定试剂盒(化学发光法)
【生产厂家】北京源德生物医学工程有限公司
【批准文号】国药准字S0076
【剂 型】试剂盒
【规 格】96人份
【医保类型】
【国家基本药物】否
【产品名称】
游离甲状腺激素(FT4)定量测定试剂盒（化学发光法）
Diagnostic Kit of Free Thyroxine (FT4) in the serum with Chemiluminescence Quantitative Immunoassay (CLIA)
Youli Jiazhuangxianjisu Dingliang Cheding Shijihe Huaxue Faguang Fa
【使用目的】
定量测定人血清或血浆中的FT4含量，适用于甲状腺功能的评价。
【概述】
游离甲状腺激素(Free Thyroid Hormone，FT4)评价甲状腺功能和研究下丘脑-垂体-甲状腺轴的主要指标之一。FT4是甲状腺激素的生物活性部分，能直接反映甲状腺功能状态，并且不受血中甲状腺素结合球蛋白（TBG）浓度及结合力改变的影响。甲亢时FT4测定数值显著高于正常范围；甲低时显著低于正常范围。慢性活动性肝炎，原发性肝汁性肝硬化也会引起FT4的下降。妊娠36周以后FT4正常生理性降低。
【试验原理】
本品系由纯化鼠抗甲状腺激素（T4）单克隆抗体包被的微孔板、生物素化FT4（FT4反应物）、辣根过氧化物酶（HRP）标记链亲合素(SA)、发光底物液(鲁米诺)和FT4校准品及其他必要辅助试剂组成的一组试剂，采用竞争法原理检测人血清、血浆中的FT4含量。
【试剂盒组成】
◆FT4包被板：8×12条（96人份）或8×6条（48人份）
◆FT4酶结合物：红色，液体
◆FT4反应物：蓝色，液体
◆FT4系列校准品：6瓶，液体。
本批校准品浓度为0，7.5，13.0，23.0，47.6，68.3pmol/L
◆FT4质控品：3瓶，冻干品，0.5ml蒸馏水复溶（备选）
本批质控品（0127）浓度范围QcⅠ5.40～9.28（7.34）pmol/L
QcⅡ12.0～14.8（13.4）pmol/L
QcⅢ28.7～48.3（38.5）pmol/L
◆浓缩洗涤剂：1瓶，液体。20倍稀释后使用
◆发光液A，B：各1瓶，淡蓝色液体
◆说明书1份
◆盖板膜2片
◆发光液混合瓶（黑色）1个
◆试剂盒参数IC卡一张
【适用仪器】
北京纬晓公司生产的MPC-1型微孔板单光子计数仪或其它微孔板单光子计数仪
北京纬晓公司生产的微孔板洗板机及其它微孔板洗板机
【样本要求】
◆采血后立刻分离出血清或血浆用于分析，可使用枸橘酸钠（10.9mmol/L全血）或肝素钠（20～30U/mL全血）作抗凝剂，EDTA对测定值有影响不能使用，采集样本如在24小时之内使用，可于2-8℃中保存，长期存放应保存在-20℃以下，并避免反复冻融。
◆高脂血症样本不影响测定，但取样时应注意准确性。
◆血中血红蛋白能影响测定，溶血样本不能用于测定。
◆样品中胆红素浓度大于15mg/mL时，将使检测结果偏低，低于或等于15mg/mL时，对本检测方法的干扰可忽略不计。
◆微生物污染的样本对测定结果的影响尚未确定。
【试验方法】
◆试剂准备
1使用前试剂盒平衡到室温。
2用蒸馏水将浓缩洗涤液稀释20倍后使用。
3每瓶冻干校准品加入0.5ml蒸馏水、每瓶质控品加入0.5ml蒸馏水，轻摇混匀，静置15-20分钟，至冷冻干燥的校准品完全复溶后使用。
4使用前5分钟取适量发光液A与发光液B等体积混和。
◆分析过程
1每孔加入校准品或质控品或样品50μl，然后加入50μlBIO-FT4和50μl酶结合物。
2将微孔板在震荡器上，震荡片刻后用板盖膜将板孔盖好，置于37℃水浴箱中温育1小时。
3吸出或倒出反应液后，加入洗涤液洗五次，洗涤液量每次每孔不少于200l，吸出或倒出洗涤液后拍干。也可用洗板机洗涤。
4每孔加入发光液100l，放置10分钟后测定相对发光强度。
5在软件支持下将各孔位按实验需要定义，并按软件提示输入IC卡信息。
6实验过程简要说明如下表所示
单位：l
校准品孔
质控品和样品孔
校准品
50
—
质控品和样品
—
50
FT4反应物
50
50
FT4酶结合物
50
50
混匀37℃温育1小时，吸出或倒出反应混合液后，加入洗涤液洗五次，吸出或倒出并拍干后，加入100mL发光液，10分钟后测定相对发光强度。
◆实验过程中应注意
1任何临床样本都应作为具有传染性样品对待。
2试剂混匀时避免起泡，并使用新吸头以避免污染。
3在加入样本及试剂时应沿着孔壁加入，以免外溅。
4发光液和酶标记物要避免强光的直射。
5试剂盒不要长时间放置于室温下，应于2-8℃保存，并在有效期内使用。
6开封后未使用的发光板条应重新封好并保存在2-8℃。
7同一次实验不要使用不同批次的试剂。
8测定相对发光强度应在加入发光液后10-30分钟内，测定时室温应于20-30℃之间。
9测定样品较多时应保证每块板从加发光液到测量时，间隔时间的一致性。最好是每块板都做校准品曲线。
10实验中校准品、质控品和样品须同时测定。
11试剂的非特异性结合非常小，实验时可以忽略不计。
◆质量控制
1校准品线性回归系数不小于0.9900。
2质控品（选购或自制）测值在允许范围内。
同时满足上述条件则检测结果可确认。
◆测定结果的计算
用经典的Logit-Log回归方法来处理数据。根据样品孔相对发光强度可以从线性回归直线上反推算出样品中FT4的浓度值。
◆样品分析实例
浓度
(pmol/L )
RLU
平行孔1
RLU
平行孔2
RLU
平均值
B/B0
测定浓度
(pmol/L)
校准品A
0
80704
78815
79760
-
校准品B
5.0
47458
49604
48531
60.85%
-
校准品C
11.0
40110
40151
40131
50.31%
-
校准品D
19.0
35814
33799
34807
43.64%
-
校准品E
43.0
25154
23987
24571
30.81%
-
校准品F
110.0
17112
17900
17506
21.95%
-
样品1
45823
47991
46907
58.81%
